PCRとは？

生物学用語辞典

DNA増幅

同義/類義語：DNA増幅実験
英訳・(英)同義/類義語：DNA amplification, DNA amplification, PCR, Polymerase chain reaction (PCR)

DNA分子の特定の領域または全体を、さまざまなDNAポリメラーゼを利用して量的に増幅する実験手法。耐熱性酵素とプライマーを用いるポリメラーゼ連鎖反応(PCR）や、ローリングサークル型のDNA合成を利用する方法などが開発され、使われている。

PCR法

同義/類義語：ポリメラーゼ連鎖反応, ポリメラーゼ連鎖反応法, ポリメラーゼチェイン反応法, ポリメラーゼチェーン反応
英訳・(英)同義/類義語：polymerase chain reaction, , PCR , PCR, PCR method, , polymerase chain reaction, PCR

DNAポリメラーゼを利用してDNA分子の特定の領域を増幅させる実験手法で、目標領域の両端に相補的な20塩基程度のオリゴヌクレオチド、基質dNTP、鋳型となるDNA、耐熱性DNAポリメラーゼのを含む反応液を、高温での熱変成、低温でのプライマーと鋳型DNAとの特異的結合、プライマーからのDNA合成、さらに熱変成の各段階を数十回繰り返すことで幾何級数的にプライマーの組を両端に持つDNA断片が増幅される。８０年代に開発された代表的な技術で、遺伝子組み換実験の基礎技術での一つであることから、開発者がノーベル賞を受賞した。

分子生物学用語集

PCR(ポリメラーゼ連鎖反応)

DNAやRNAの特定の部分を増幅する方法。プライマーと呼ばれる短いDNA断片を鋳型となる核酸にアニールし、ポリメラーゼで連鎖的に伸長する。微量の鋳型からでも増幅でき、反応が2時間程度と短時間であるため、遺伝子工学研究では必要不可欠な技術となっている。

ポリメラーゼ連鎖反応

PCRがかからない場合に

PCRに必要な要素

PCRの操作は簡単ですが、反応は多段階・多基質の複雑な反応です。酵素と基質が適切な濃度や純度で存在していることは大切です。

ポリメラーゼ	TaqやPfuなど。これが無ければ無反応。
鋳型DNA	純度は大丈夫？
dNTP	材料が無ければポリメラーゼも仕事がありません。
forwardプライマー	一応、ストック濃度の確認を。
reverseプライマー	fwd同様、濃度の確認。 注文するときの向き（5'-の位置）は大丈夫でしたか？

その他のチェック

ダイマーチェック

自己ダイマーやループ形成、fwd/revペアのダイマー形成が起きないかどうか市販のソフトなどでチェックします。

プライミング部分の安定性

PCRで用いるポリメラーゼは、プライマーの3'末端で酵素/DNA複合体を形成し、鎖延長をはじめます（プライミング）。3'末端の安定性を上げるために3'末端がGCペアであることが好ましいと言われています。

マルチクローニングサイト

プライマーが回文配列の多い部分を幅広くカバーしていると、プライマーダイマー形成の可能性が高くなります。どうしてもダイマーが増えてしまう場合は、わざとプライマー濃度を下げるのも手です。

プライマーダイマー

PCR反応でのプライマーは鋳型DNAに比べて高濃度に存在するため、配列によってはプライマー同士でアニーリングしてしまいます。安定な二本鎖DNA（プライマーダイマー）が形成してしまうと、そのDNA断片だけが指数関数的に増幅されてしまい、目的のDNA断片が得られません。

分子間ダイマー形成

鋳型となる核酸でなく、プライマー分子間でアニールしてしまうと、ポリメラーゼが3'末端にヌクレオチドを繋げ、短い生成物が増幅してしまう。

同じプライマー同士のダイマー形成

FwdプライマーとRevプライマーのダイマー形成

分子内ヘアピンループ形成

この場合、目的のPCR反応に関与できない。また、配列によってはポリメラーゼが3'末端に相補ヌクレオチドを繋げてしまい、ループ構造がさらに安定化してしまう。

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バイテク用語集

PCR

【英】： Polymerase Chain Reaction

ポリメラーゼ連鎖反応、複製連鎖反応ともいわれる。

DNAの特定部位をはさむ２種類のDNA断片（プライマー）とDNAを合成する酵素（DNAポリメラーゼ）によるDNA鎖の合成反応。この反応の繰り返しにより、DNA特定部位を数十万倍程度まで増幅させることができる。

また、DNA合成のプロセスには、時間が数分しかかからないことから、このPCR法の利用が急速に広まった。PCR法は遺伝子配列の決定や遺伝子の定量など、遺伝子研究の基本技術として確立されている。近年では、クラミジア、HIV、結核菌などの診断薬として応用されている。

ポリメラーゼ連鎖反応、複製連鎖反応ともいわれる。 DNAの特定部位をはさむ２種類のDNA断片（プライマー）とDNAを合成する酵素（DNAポリメラーゼ）によるDNA鎖の合成反応。この反応の繰り返しにより、DNA特定部位を数十万倍程度まで増幅させることができる。 また、DNA合成のプロセスには、時間が数分しかかからないことから、このPCR法の利用が急速に広まった。PCR法は遺伝子配列の決定や遺伝子の定量など、遺伝子研究の基本技術として確立されている。近年では、クラミジア、HIV、結核菌などの診断薬として応用されている。

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・ デオキシリボ核酸

・ プライマー

・ 遺伝子

健康用語の基礎知識

PCR

PCR(polymerase chain reaction、ポリメラーゼ連鎖反応)法は、DNA配列の断片を大量に増幅する分子生物学の手法です。鋳型となるDNA、DNA合成の起点となるプライマー、DNAの材料となるヌクレオチド、DNA合成酵素などをチューブ内に入れ、94℃（DNAを1本鎖に熱変性させる）→55℃（プライマーをDNAに対合させる）→72℃（DNAを合成する）といった3段階の温度変化を周期的に行わせるだけで、2本のプライマーにはさまれたDNA断片を短時間でおよそ10万倍に増幅できます。1988年Mullisは、PCR反応に温泉から分離された好熱菌由来のDNA合成酵素を用いる方法を確立し、1993年にノーベル化学賞を受賞しています。現在では、DNA診断、DNAクローニング、細菌やウイルスの検出、さまざまな生物のゲノム決定などの幅広い分野で利用されています。PCR法の発見がなかったら現在のバイオの発展はもっと緩慢なものになっていたでしょう。

エイズ関連用語集

ＰＣＲ法

PCR, Polymerase chain reaction

【概要】 ノーベル賞をとった核酸増幅法の一つ。最初に検体からDNAを抽出する。これをDNA分解酵素で断片化したあと、高温にして1本鎖にし、次に目的遺伝子に特有のプローブ(短い遺伝子)と塩基を加え、DNAポリメラーゼを反応させる。そうすると相補性のDNA鎖が合成され2本鎖の割り箸のようなDNAができる。試験管を高温にすると割り箸が割れるようにDNAは1本鎖に別れる。温度を下げるとまたプローブとの反応が進む。これを繰り返すと1本の遺伝子断片が、2本、4本、8本、16本、、と倍々で増えて行く。数十回繰り返すと、元の遺伝子が数十万倍に増える。あらかじめ量がわかった遺伝子を入れて並行して反応させれば、測定検体と比較して定量できる。　

【問題点】 感度の高さが逆に弱点になる。つまり実験環境から間違った遺伝子が潜り込むことがある。また拾い上げるべき遺伝子の配列(プライマー)の設計がポイントになる。目的遺伝子の変異が激しい場合は、複数のプライマーを組み合わせて見逃しを避けなければならない。　

【応用】 ロシュ社ではクラミジアトラコマチス、淋菌、結核菌、Mアビウム、Mイントラセルラーの診断キットを市販しており、ウイルスではHBV、HCV、HIV-1の定量測定キットを市販している。HIV感染症における応用としては、(1)HIV抗体ができる前の、急性HIV感染症の診断、(2)感染母体からの移行抗体をもつ胎児・新生児のHIV感染の診断がある。細胞からDNAを抽出する場合はプロウイルスを検出できる。

《参照》 ＨＩＶ抗体、 サイレントインフェクション、 ＨＩＶ、 ＲＮＡ、 ＲＴ－ＰＣＲ法、 結核

PDQ®がん用語辞書

pcr

【仮名】pcr
【原文】PCR

ポリメラーゼ連鎖反応。特定のdna配列のコピーを大量に作るために研究室などで用いられる技法。「polymerase chain reaction（ポリメラーゼ連鎖反応）」とも呼ばれる。

食品の安全性に関する用語集

PCR法

極めて微量な遺伝子（DNA）を含む溶液の中から自分の望む特定のDNA領域（数百から数千塩基対）を短時間で効率的に大量に増やすことのできる技術です。原 理は、生体細胞の中で起きている酵素反応です。細胞分裂の際にDNA が複製されるときには、二本鎖のらせん構造を取っているDNAがほどけて1本ずつになり、それぞれの鎖を鋳型にしてペアになるDNAが酵素で合成されますが、PCRはこのようなDNA複製の反応を試験官の中で繰り返し行う方法です（1時間程度の反応で1千万倍にまで増やすことも可能です）。

ウィキペディア

PCR

出典: フリー百科事典『ウィキペディア（Wikipedia）』 (2020/12/10 08:36 UTC 版)

PCR

• Pressure sensitive Conductive Rubber：加圧導電ゴム
• Peak Cell Rate：ネットワークの上限伝送速度
• Polymerase Chain Reaction：ポリメラーゼ連鎖反応
• Plaque Control Record：プラークコントロールレコード
• Priority Club Rewords：プライオリティクラブリワーズ
• Partidul Comunist Român：ルーマニア共産党
• Parti Chrétien Républicain：キリスト教共和党