クローニング【cloning】
クローン、クローニング
クローニング [Cloning]
現在、種々の生物がもっている特定の遺伝子を他種の生物体へ組替え、導入して遺伝的に改良された生物種の作成や特定の遺伝子を用いた研究が盛んになってきた。現在、バイオテクノロジー、生物工学あるいは生命工学(biotechnology)とよばれて発展している分野では種々の遺伝子組替え技術(発酵、細胞融合、形質転換など)が応用されている。
クローニング
クローニング
出典: フリー百科事典『ウィキペディア（Wikipedia）』 (2022/05/10 13:36 UTC 版)
プラスミドは、最も一般的に使用される細菌のクローニングベクターである。これらのクローニングベクターは、DNAフラグメントを挿入できる部位(例えば DNA断片をライゲーションすることができるように設計された、複数の制限サイトを有するマルチクローニングサイトやポリリンカー）を含む。目的の遺伝子が挿入された後、プラスミドは形質転換と呼ばれるプロセスによって細菌に導入される。これらのプラスミドには、選択可能なマーカーとして通常は抗生物質耐性遺伝が含まれており、特定の抗生物質を含む選択的増殖培地で生存および増殖する能力を細菌に付与する。形質転換後の細胞は選択培地に曝露され、プラスミドを含む細胞のみが生存することができる。このように、抗生物質はプラスミドDNAを含む細菌のみを選択するためのフィルターとして機能する。ベクターはまた、クローン化された挿入配列を有するプラスミドを用意に選択できるようにするために、他のマーカー遺伝子またはレポーター遺伝子を含むことがある。次に、プラスミドを含む細菌を大量に増殖させて回収し、その後、プラスミド調製によって目的のプラスミドを単離することができる。 プラスミドクローニングベクターは通常、最大15kbp程度のDNAフラグメントをクローニングするために使用される。より長いDNAをクローン化するには、溶原性遺伝子が削除されたラムダファージ、コスミド、細菌人工染色体（BAC）、または酵母人工染色体（YAC）が使用される。
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クローニング
出典: フリー百科事典『ウィキペディア（Wikipedia）』 (2021/08/08 07:04 UTC 版)
レトロウイルス導入によって突然変異誘発されたBXH2およびAKXD組換え近交系マウスは、骨髄性白血病、B細胞・T細胞白血病を高頻度で発症することが知られている。 2002年、Himmelらは、この急性骨髄性白血病のモデルを用いて、Evi24と呼ばれるレトロウイルスの取り込み部位の下流に新規Dblファミリーグアニンヌクレオチド交換因子遺伝子が含まれることを示し、Clgと名付けた。 HemmelらはClgをクローニングし、ヒト19番染色体19q13.1領域に含まれるPLEKHG2と相同性があることを示し、急性骨髄性白血病との関連を指摘した。
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