培養方法

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培養方法

出典: フリー百科事典『ウィキペディア（Wikipedia）』 (2021/11/21 04:23 UTC 版)

「組織培養」の記事における「培養方法」の解説

培養段階は外の植物から無菌の器内に導入する初代培養、それをある程度増殖する継代培養、大量に増殖する大量増殖、増殖した種苗を器外で生存できるように慣らす順化の4段階に分けられる。大量に増殖する必要がないときは継代培養や大量増殖培養の段階を省くことがある。ウイルスフリーにするための茎頂培養は初代培養時に、遺伝子組み換えやプロトプラスト培養などは継代培養時に行うことが多いが、必ず、ではない。

培養方法

出典: フリー百科事典『ウィキペディア（Wikipedia）』 (2020/02/25 01:34 UTC 版)

「イカタケ」の記事における「培養方法」の解説

未熟で白色の卵状をなしているものを選び、その内部組織を無菌的に取り出して培地に植えつければ、比較的簡単に純粋培養菌株を得ることができる。麦芽エキス寒天培地上では、菌糸は5-39℃の温度範囲で生存するが、生育の至適温度は30-34℃である。 培地としては、麦芽エキス寒天培地のほか、ジャガイモ＝ショ糖寒天培地やフレグラー氏（Flegler）寒天培地（ブドウ糖1 g、麦芽エキス5 g、硝酸アンモニウム 0.5 g、リン酸二水素カリウム0.5 g、硫酸マグネシウム七水塩 0.5 g、クエン酸鉄 5 mg、チアミン塩酸塩 0.1 mg、蒸留水1000 ml）なども使用でき、適度な水分を含ませたイネわらを用いることもできるが、これらの培地上では子実体の形成はみられない。乾燥酵母を添加した浜田培地上では、ときに子実体形成をみることがあるが、確実性には欠けるという。 子実体形成を安定して誘導するための培養手法としては、イネわら（またはイネのもみがら）とフレグラー氏培地とを併用する方法が考案されており、その手順は以下の通りである： イネわら10 gを長さ2-3 cmにカットし、内径9 cm・高さ7.5 cmの腰高シャーレに詰める。 イネわらを詰めた腰高シャーレに、200 mlの Flegler氏培養液を加え、120℃で30分間の高圧滅菌を行い、培地が冷めた後、余分な培養液を無菌的に捨てる。 あらかじめ麦芽エキス寒天培地上で純粋に生育させておいたイカタケの菌株を植えつけ、30℃の暗黒下で培養する。 培地全体に菌糸がじゅうぶんに蔓延した後（培養開始から13-19日経過後）に、25℃の雰囲気下に移し、100-200ルクスの照度（10 Wのタングステンランプを用いるとよい）を与えながら後培養を行う。この際、腰高シャーレの側壁を、黒色のビニールテープを用いて外面から覆って遮光する（子実体がシャーレの壁面に密着して形成されるのを防ぐため）とよい。 照明下での後培養を開始してから、おおよそ一ヶ月程度で成熟した子実体が形成される。 なお、上記の操作において、照明下であっても30℃のままで培養を継続した場合、あるいは25℃に移しても照明を行わなかった場合には、子実体は形成されなかったという。

培養方法

出典: フリー百科事典『ウィキペディア（Wikipedia）』 (2021/02/13 01:54 UTC 版)

「ペラジバクター・ユビーク」の記事における「培養方法」の解説

分離技術の向上により、P. ubiqueは複数の株の培養が成功している。最も研究されている株は、HTCC1062株(HTCCはHigh-Throughput Cultivation Collection;ハイスループット培養コレクション)である。この株はP. ubiqueのタイプ株である。メチオニン(硫黄源)、グリシン、ピルビン酸、ビタミンを添加した、完全人工培地で生育できる。 SAR11の細胞数を制御している要因の大部分は不明である。この系統は窒素、リン酸塩、および鉄の制限に感受性があり、硫黄化合物を減らす必要があるという非常に珍しい特徴がある。これらは、最初に発見されたサルガッソ海などの低栄養生態系において進化したことによって形成された性質であると考えられている。 P. ubiqueの細胞集団の倍加速度は29時間ほどであり、かなり遅いが、低栄養条件下で培養することが可能である。