ベクター中に付加される機能の例とは? わかりやすく解説

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ベクター中に付加される機能の例

出典: フリー百科事典『ウィキペディア(Wikipedia)』 (2021/12/03 07:15 UTC 版)

ベクター (遺伝子工学)」の記事における「ベクター中に付加される機能の例」の解説

人工的に構築されベクターには、予め必須コンポーネント含まれており、一部ベクターについてはその他の追加機能含まれている。 複製起点宿主細胞内でのベクター複製維持に必要となる。 プロモータープロモーターは、ベクター導入遺伝子および抗生物質耐性遺伝子などのベクター内の他の遺伝子転写促進するために使用される一部クローニングベクターは、クローニングされたインサートプロモーターを必要としないが、クローニングされた産物発現させるため発現ベクターにおいては必須の構成要素となる。 クローニングサイトライゲーション通じて外来DNAベクター挿入できるマルチクローニングサイト領域遺伝的マーカーベクター宿主ゲノムDNA統合されていることを確認するための遺伝的マーカー抗生物質耐性抗生物質耐性遺伝子備えたベクターは、抗生物質を含む成長培地培養することで、ベクター取り込んだ細胞選択することができる。 エピトープ一部ベクターには、発現しタンパク質組み込むことができる特定のエピトープ配列含まれている場合がある。これにより、標的タンパク質発現する細胞抗体同定可能にする。 レポーター遺伝子一部ベクターには、挿入配列含んでいるプラスミド同定するためのレポーター遺伝子含まれている場合がある。代表的な例は、ガラクトース消化する酵素であるβ-ガラクトシダーゼN末端フラグメントコードするlacZ-αである。マルチクローニングサイトlacZ内部に含むことで、ベクターへのライゲーション成功する遺伝子配列破壊されβ-ガラクトシダーゼ不活性させることができる。細胞ガラクトース類似体(X-gal)を含む培地培養することで、コロニーの色に青/白の変化がつくため、容易に挿入配列入ったベクターのみを識別して選択することができる(ブルー・ホワイトセレクション)。すなわち、β-ガラクトシダーゼ発現している細胞インサート含まれない)は青いコロニーになる反面挿入物を含む可能性があるものは白いコロニーとなる。 その他の一般的に使用されるレポーターには、 緑色蛍光タンパク質ルシフェラーゼ挙げられるターゲティング配列発現しタンパク質を、細胞内の特定の細胞小器官細菌ペリプラズム空間などの特定の場所に誘導するように、タンパク質ターゲティング配列付加する場合がある。 タンパク質精製タグ一部発現ベクターには、発現しタンパク質精製容易にするタンパク質またはペプチド配列含まれている。 例としては、ポリヒスチジンタグ 、グルタチオン-S-トランスフェラーゼマルトース結合タンパク質などが挙げられる。これらのタグいくつかは、標的タンパク質溶解度高めることもできる標的タンパク質タンパク質タグ融合するが、タンパク質タグの間のポリペプチドリンカー領域配置されプロテアーゼ切断部位により、タグを後から除去することができる。

※この「ベクター中に付加される機能の例」の解説は、「ベクター (遺伝子工学)」の解説の一部です。
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