実験プロトコールの記述

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実験プロトコールの記述

出典: フリー百科事典『ウィキペディア（Wikipedia）』 (2022/04/17 06:31 UTC 版)

「IMRAD」の記事における「実験プロトコールの記述」の解説

以下は、架空の研究について、Methods部分に実験プロトコールを記載した例である（例は架空の研究の架空の結果である）。なお、ここでは解説のために、表形式にして、文に番号を振っているが、現実の論文において本文が表形式になっているわけではない。 ＃原文(Original text)英訳(English translation)備考(Notes)1 ◆X細胞の継代作業 ◆Sub-culturing of X cells 2 ディッシュ(本節ではディッシュAと称す)内の細胞がある程度増えたら、継代作業を実施する。 After the cells, in dish (dish A in this chapter), increase to certain level, it should be sub-cultured. 3 継代作業とは、ディッシュ(ディッシュA)内の細胞を回収し、一部を別のディッシュ(本節ではディッシュBと称す)に移し替える(播種する)作業のことである。 Cell passaging is a process that harvests cells from dish (dish A) and trans locates (seeding) a part of it to another dish (dish B in this chapter). 4 継代作業を実施するタイミングは、ディッシュA内の細胞密度が概ね90%コンフルエントになったタイミングであり、そのタイミングとは、元のディッシュA (ディッシュA)に細胞を播種した時点から概ね3日後である。 Cell should be passaged when the density of the cell, inside the dish A, is 90% confluent. Cell should be passaged 3 days after seeded in dish A (dish A). 5 継代作業の詳細な手順は、概ね以下のとおりである。 Detailed procedure of cell passaging, in general, is as follows: 6 工程1.培地除去:CO2インキュベータからディッシュAを取出したのち、ディッシュAから培地を除去する。 Procedure 1. Medium removal:Take out dish A from CO2 incubator and remove medium from it. 7 工程2.洗浄:続いて、洗浄液をディッシュAに注ぐ操作と除去する操作を数回繰り返すことで、細胞を洗浄する。 Procedure 2. Washing: Wash the cell by repetitive action of pouring and removing cleaning liquid in the dish A. 8 洗浄完了時点ではディッシュAから洗浄液が除去されている(ディッシュA内には洗浄液が無い状態)となる。 At the completion of cell washing, washing solution should be removed from dish A, completely (No cleaning liquid in dish A). 9 工程3.酵素処理:細胞を、ディッシュ底面から剥離させるために、細胞接着を切断する酵素をディッシュAに分注する。 Procedure 3. Enzyme Treatment:Dispense the enzyme that separates cell adhesion, in dish A. It will detach cell from bottom of the dish. 9-15 (中略) (中略) 16 工程8.ディッシュBの準備:新しいディッシュ(ディッシュB)に、あらかじめ新鮮な培地を分注しておく。 Procedure 8. Preparation of dish B: Dispense fresh medium in new dish (dish B) in advance. 17 培地の分注量は、液面の高さがディッシュの高さの1/3程度となるような量とする。 The amount of medium, to be dispensed, should be one third of the height of the dish. 18 工程9.播種: 続いて、ディッシュBから電動ピペッターを用いて吸引した培地の一部(約5mL相当)を、工程7の遠心管に分注し、上記のペレット状の塊をほぐすようにピペッティングをする。 Procedure 9. Seeding: Dispense a part of medium (approx.5ml), which is absorbed by using electric Pipetter, into centrifugal tube (mentioned in procedure 7). And pipette to loosen above mentioned cells in pellet-shaped mass. 19 その結果得られた液体成分を、再びディッシュBに戻す。この作業を、ペレットが消失するまで繰り返えす。 Return the resulting fluid to dish B. Repeat the process till the dissipation of pellet. 20 注意事項1：工程2の培地吸引の工程においては、以下のことに注意すること。 Precaution 1: Note the following, in the process of absorption of medium in procedure 2. 21 図1のように、ディッシュを左手（利き手の反対の手）で持ち、アスピレータを用いて培地を吸引する。 Hold the dish in left hand as in figure 1 (another than dominant hand) and absorb the medium by aspirator. 22-28 (後略) (後略)