ポリアクリルアミド【polyacrylamide】
ポリアクリルアミド
出典: フリー百科事典『ウィキペディア（Wikipedia）』 (2021/06/21 06:12 UTC 版)
詳細は「ポリアクリルアミドゲル電気泳動」を参照 ポリアクリルアミドゲル電気泳動（Polyacrylamide gel electrophoresis、PAGE）は、ポリアクリルアミドゲルの均一な細孔径を利用して、大きさが5～2,000 kDaのタンパク質を分離する方法である。ゲルの細孔径は、アクリルアミドとビスアクリルアミド粉末の濃度を調整することで管理される。アクリルアミドは液体や粉末の形態では強力な神経毒であるため、この種類のゲルを作成するときは注意を要する。 マキサム-ギルバート法（英語版）やサンガー法（英語版）などの従来のDNAシークエンシング技術では、ポリアクリルアミドゲルを使用して、長さが1塩基対の異なるDNAフラグメントを分離し、その配列を読み取ることができる。現在では、ほとんどの最新のDNA分離法はアガロースゲルを使用している（特に小さなDNAフラグメントは除く）。これは現在、免疫学およびタンパク質分析の分野で最もよく用いられており、異なるタンパク質や同じタンパク質のアイソフォームを別々のバンドに分離するためによく使われる。これらをニトロセルロースやPVDF膜に転写し、ウェスタンブロットのように抗体や対応するマーカーでプローブ（探索）することができる。 一般的に分離ゲルは、6%、8%、10%、12%、または15%で作成される。その分離ゲルの上にスタッキングゲル（5％）を流し込み、ゲルコームを挿入するウェルを形成し、タンパク質、サンプルバッファー、およびラダーを配置するレーンを定義する）。選択されるパーセンテージは、サンプル内で識別またはプローブしたいタンパク質の大きさによって異なる。判明している分子量が小さいほど、使用するパーセンテージは高くなる。ゲルの緩衝系を変更すると、非常に小さい大きさのタンパク質をさらに分離することができる。
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