定量方法とは? わかりやすく解説

定量方法

出典: フリー百科事典『ウィキペディア(Wikipedia)』 (2021/02/16 00:28 UTC 版)

リアルタイムPCR」の記事における「定量方法」の解説

Realtime PCRでの定量方法は、コピー数を算出する絶対定量法相対値発現調べ相対定量法分けられる絶対定量法とは、あらかじめ濃度分かっている目的産物DNA段階希釈し希釈系列用いてReal time PCR行い検量線書き濃度不明サンプルCt値を検量線あてはめコピー数を計算するのである。主にウイルス細菌検出用いられる一方で相対定量法は、主にmRNA発現定量に最も一般的に用いられている方法で、目的遺伝子リファレンス遺伝子同時に解析しリファレンス遺伝子比べ目的遺伝子がどれだけ発現しているかを相対的に比較したのである前提条件として、リファレンス遺伝子目的遺伝子の増幅効率が同じであること、解析する全てのサンプルリファレンス遺伝子安定して一定発現していることが重要である。PCR増幅効率確認する方法としては、検量線傾きSlopeとし、 E = 101 / S l o p e − 1 {\displaystyle E=10^{-1/Slope}-1} で計算出来る。

※この「定量方法」の解説は、「リアルタイムPCR」の解説の一部です。
「定量方法」を含む「リアルタイムPCR」の記事については、「リアルタイムPCR」の概要を参照ください。

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