核質抽出液(nucleplasmic extract [NPE])
出典: フリー百科事典『ウィキペディア(Wikipedia)』 (2020/12/26 03:15 UTC 版)
「カエル卵抽出液」の記事における「核質抽出液(nucleplasmic extract [NPE])」の解説
S期抽出液に大量の精子クロマチンを加えて細胞核を形成させ(1 μLあたり、~10,000個)、その反応液を希釈せずに遠心すると核が最上層に分離される。この核成分のみを集めてさらに強い力で遠心すると、上澄と沈殿(核膜やクロマチンが含まれる)に分かれる。上澄は核の可溶性成分からなり、これを核質抽出液と呼ぶ。DNAをS期のHSSでインキュベーションした後に、NPEを加えると複製が起こる。通常のS期抽出液ではDNAの周辺に核が形成されることが複製開始の前提となるが、このプロトコルでは核形成なしに複製を誘導できることが大きな特長である。この方法を用いることによって、複製開始に至るプロセスを詳細に解析できるようになった。また、プラスミドDNAなど(精子由来ではないDNA)を用いた場合にも、高い効率でDNA複製を再現することができる。この特徴を活かし、損傷を導入したDNAを用いたDNA修復メカニズムの研究も行われている。
※この「核質抽出液(nucleplasmic extract [NPE])」の解説は、「カエル卵抽出液」の解説の一部です。
「核質抽出液(nucleplasmic extract [NPE])」を含む「カエル卵抽出液」の記事については、「カエル卵抽出液」の概要を参照ください。
- 核質抽出液のページへのリンク