ELISA法
英訳・(英)同義/類義語:enzyme linked immunosorbent assay, ELISA method
抗原抗体反応を利用した実験技術で、一次抗体もしくは二次抗体に、アルカリホスファターゼ等の酵素を結合させたものを利用し、抗原の検出定量を、酵素反応産物を調べてることで行う手法。
実験方法装置単位など: | Cy3蛍光色素 DAPI蛍光色素 Drosophila形質転換用ベクター ELISA法 FISH法 GFP融合遺伝子法 K選択 |
ELISA法
【概要】 イライザほうと読む。酵素抗体法。世界で広く採用されている抗体スクリーニング検査法。微量なものも計ることができることを感度が高いという。ELISA法は自動化機械で一度に大量の検査ができ、酵素の基質を化学蛍光発光物質にするなど精度・感度と測定域の拡大も著しい。大規模な検査室向きで試薬の値段は安い。
【理論】 HIV抗体測定の場合で説明する。まず試験管の中にHIV由来の蛋白抗原をくっつけておく。これに患者の血清を加えると、HIV抗体があれば試験管の表面にある抗原に結合する。これに別の抗体に対する抗体(酵素をくっつけてある)を加えると、くっついた量に応じて酵素が沢山になる。色素反応をさせて、色が濃くなればHIV抗体が多いことになる。この組合わせを変えれば抗原量も計れる。
ELISA (分析法)
(ELISA 法 から転送)
出典: フリー百科事典『ウィキペディア(Wikipedia)』 (2022/03/30 07:27 UTC 版)
ELISA(英: enzyme-linked immunosorbent assay) は、試料中に含まれる抗体あるいは抗原の濃度を検出・定量する際に用いられる方法。「酵素結合免疫吸着法」などの訳語があるが定訳はなく、一般に「エライサ」あるいは「エライザ」と呼ばれる。
- ^ a b タンパク質は表面電荷や疎水相互作用によりこれらの表面に非特異的に吸着する。一般に、タンパク質を固相に吸着させる場合は、タンパク質の等電点よりもアルカリ側の方が良いとされる。
- ^ a b c ブロッキングは、酵素抗体反応および酵素反応に無関係なタンパク質で固相表面を覆い、後のステップで作用させるタンパク質が固相表面に吸着されるのを防ぐ目的で行われる。
- ^ a b c 二次抗体を用いるメリットとして以下の点が考えられる。二次抗体(通常ポリクローナル抗体を用いる)は一次抗体に複数箇所で結合するため、一つの一次抗体に対して複数の二次抗体、すなわち複数の酵素で標識することができる。したがって、二次抗体を使用することで増感効果を得ることができる。また、一次抗体に酵素を標識すると、定量したいタンパク質に対する抗体ごとに酵素標識を施さなくてはならないが、二次抗体を用いることで一次抗体に酵素を標識する必要がなく、複数のタンパク質の検出に対して、用意する酵素標識抗体が一種類でよいため経済的である。
- ^ a b c 一般的に、抗体に結合させる酵素には西洋ワサビペルオキシダーゼ(HRP、HorseRadish Peroxydase)あるいはアルカリホスファターゼ(ALP、 Alkaline Phosphatase)が用いられる。
- ^ 加えられた抗体は、固相に吸着している抗原および試料中の抗原に等しく反応を起こし、その反応は定量的に起こる。したがって、固相に結合する一次抗体量は試料中の抗原濃度に依存し、試料中の抗原が多ければ多いほど、結合する一次抗体量は少なくなる。
- ^ NAKANE, PAUL K., and G. BARRY PIERCE JR. "Enzyme-labeled antibodies: preparation and application for the localization of antigens." Journal of Histochemistry & Cytochemistry 14.12 (1966): 929-931.
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- ^ Van Weemen, B. K., and A. H. W. M. Schuurs. "Immunoassay using antigen—enzyme conjugates." FEBS letters 15.3 (1971): 232-236.
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- ^ “生化夜話 第22回:イムノアッセイでイヌのアッセイ - RIAとEIA/ELISA”. Cytiva. 2020年9月28日閲覧。
- 1 ELISA (分析法)とは
- 2 ELISA (分析法)の概要
- 3 関連項目
ELISA法
出典: フリー百科事典『ウィキペディア(Wikipedia)』 (2022/06/08 22:05 UTC 版)
血清中のヨーネ菌に対する抗体を検出するヨーネ病の診断法。企業が生産販売しているキットを購入して実施する。
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「ELISA 法」の例文・使い方・用例・文例
- 違法行為
- 特別法を通過成立させる
- 災害救助法
- この建物は建築基準法に違反している
- 法を施行する
- わが校は新しい教授法を採用した
- この辞書はすべて英文法に関するものだ
- 人生を向上させる方法は常にある
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- 独裁者は司法権を自分のものとした
- 私はその法律事務所に関係している
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- ひどい不作法
- 完璧な作法を身につけないと紳士にはなれない
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