ELISA法とは? わかりやすく解説

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ELISA法

Enzyme linked immunosorbent assay

【概要】 イライザほうと読む。酵素抗体法世界で広く採用されている抗体スクリーニング検査法。微量なものも計ることができること感度が高いという。ELISA法は自動化機械一度大量検査ができ、酵素基質化学蛍光発光物質にするなど精度感度測定域の拡大著しい。大規模な検査向き試薬値段は安い。  

理論HIV抗体測定場合説明する。まず試験管中にHIV由来蛋白抗原くっつけておく。これに患者血清加えると、HIV抗体があれば試験管表面にある抗原結合する。これに別の抗体対す抗体(酵素くっつけてある)を加えると、くっついたに応じて酵素沢山になる。色素反応をさせて、色が濃くなればHIV抗体が多いことになる。この組合わせ変えれば抗原量も計れる。

《参照》 スクリーニング検査抗原抗体HIV抗体偽陽性偽陰性


ELISA (分析法)

(ELISA法 から転送)

出典: フリー百科事典『ウィキペディア(Wikipedia)』 (2022/03/30 07:27 UTC 版)

ELISA: enzyme-linked immunosorbent assay) は、試料中に含まれる抗体あるいは抗原濃度を検出・定量する際に用いられる方法。「酵素結合免疫吸着法」などの訳語があるが定訳はなく、一般に「エライサ」あるいは「エライザ」と呼ばれる。


  1. ^ a b タンパク質は表面電荷疎水相互作用によりこれらの表面に非特異的に吸着する。一般に、タンパク質を固相に吸着させる場合は、タンパク質の等電点よりもアルカリ側の方が良いとされる。
  2. ^ a b c ブロッキングは、酵素抗体反応および酵素反応に無関係なタンパク質で固相表面を覆い、後のステップで作用させるタンパク質が固相表面に吸着されるのを防ぐ目的で行われる。
  3. ^ a b c 二次抗体を用いるメリットとして以下の点が考えられる。二次抗体(通常ポリクローナル抗体を用いる)は一次抗体に複数箇所で結合するため、一つの一次抗体に対して複数の二次抗体、すなわち複数の酵素で標識することができる。したがって、二次抗体を使用することで増感効果を得ることができる。また、一次抗体に酵素を標識すると、定量したいタンパク質に対する抗体ごとに酵素標識を施さなくてはならないが、二次抗体を用いることで一次抗体に酵素を標識する必要がなく、複数のタンパク質の検出に対して、用意する酵素標識抗体が一種類でよいため経済的である。
  4. ^ a b c 一般的に、抗体に結合させる酵素には西洋ワサビペルオキシダーゼ(HRP、HorseRadish Peroxydase)あるいはアルカリホスファターゼ(ALP、 Alkaline Phosphatase)が用いられる。
  5. ^ 加えられた抗体は、固相に吸着している抗原および試料中の抗原に等しく反応を起こし、その反応は定量的に起こる。したがって、固相に結合する一次抗体量は試料中の抗原濃度に依存し、試料中の抗原が多ければ多いほど、結合する一次抗体量は少なくなる。
  6. ^ NAKANE, PAUL K., and G. BARRY PIERCE JR. "Enzyme-labeled antibodies: preparation and application for the localization of antigens." Journal of Histochemistry & Cytochemistry 14.12 (1966): 929-931.
  7. ^ 蛍光抗体法と酵素抗体法の比較 (PDF)”. 2020年9月28日閲覧。
  8. ^ Van Weemen, B. K., and A. H. W. M. Schuurs. "Immunoassay using antigen—enzyme conjugates." FEBS letters 15.3 (1971): 232-236.
  9. ^ Van Weemen, B. K., et al. "Immunoassay using antibody—enzyme conjugates." FEBS letters 43.2 (1974): 215-218.
  10. ^ Engvall, Eva, and Peter Perlmann. "Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) quantitative assay of immunoglobulin G." Immunochemistry 8.9 (1971): 871-874.
  11. ^ Avrameas, S., and Brigitte Guilbert. "A method for quantitative determination of cellular immunoglobulins by enzyme‐labeled antibodies." European journal of immunology 1.5 (1971): 394-396.
  12. ^ 生化夜話 第22回:イムノアッセイでイヌのアッセイ - RIAとEIA/ELISA”. Cytiva. 2020年9月28日閲覧。


「ELISA (分析法)」の続きの解説一覧

ELISA法

出典: フリー百科事典『ウィキペディア(Wikipedia)』 (2022/06/08 22:05 UTC 版)

ヨーネ病」の記事における「ELISA法」の解説

血清中のヨーネ菌対す抗体検出するヨーネ病診断法企業生産販売しているキット購入して実施する

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「ELISA法」を含む「ヨーネ病」の記事については、「ヨーネ病」の概要を参照ください。

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