ヘマトキシリン・エオシン染色とは? わかりやすく解説

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ヘマトキシリン・エオジン染色

(ヘマトキシリン・エオシン染色 から転送)

出典: フリー百科事典『ウィキペディア(Wikipedia)』 (2025/08/18 13:03 UTC 版)

H&E染色で見られる主な染色の種類
ヘマトキシリン・エオジンで染色した網膜(目の一部)、細胞核は青紫色に、細胞外物質はピンク色に染色されている。

ヘマトキシリン・エオジン染色(ヘマトキシリン・エオジンせんしょく、英:Hematoxylin and eosin stain、haematoxylin and eosin stain、hematoxylin–eosin stain;しばしばH&E染色またはHE染色と略される)は、組織学で用いられる主要な組織染色の一つである[1][2][3] 。診断において最も広く使用されている染色法で[1]、しばしばゴールドスタンダードとされる[4]。例えば、病理学者悪性腫瘍を疑い生体組織診断をする場合、組織切片はH&E染色される可能性が高い。

H&E染色は、ヘマトキシリンエオジンという2つの組織学的染色の組み合わせである。ヘマトキシリンは細胞核を青紫色に染め、エオジンは細胞外マトリックスと細胞質をピンク色に染め、その他の構造物は様々な色合い、色相、これらの色の組み合わせになる[5][6] 。したがって、病理学者は細胞核と細胞質の部分を容易に区別することができ、さらに、染色による全体的な色調パターンは細胞の一般的な配置と分布を示し、組織サンプルの構造を概観することができる[7]。このように、専門家自身によるパターン認識と、(デジタルパソロジーにおいて)専門家を支援するソフトウェアによるパターン認識の両方が、組織学的情報を提供する。

この染色の組み合わせは、1877年にロシアのカザン大学の化学者Nicolaus Wissozkyによって発表された[7][8]

利用

H&E染色が組織学の主要な染色法[3][7][2][5] である理由は、迅速に行えること[7]、高価でないこと、顕微鏡解剖学的構造[9][10]がかなり明らかになること[7][5][4]、幅広い病理組織的状態の診断に使用できることである[8]。H&E染色の結果は、組織を固定するために使用される化学物質やラボラトリーのプロトコールにおける若干の不一致に過度に依存されないため、[11]これらの要因が組織検査におけるH&E染色の日常的な使用に寄与している[7]

H&E染色では、全ての組織、細胞構造、化学物質の分布を鑑別するのに十分なコントラストが得られないことがあり[9]、このような場合には、より特異的な染色や方法が用いられる[10][7]

Method of application

ヘマトキシリン染色液から取り出されたスライドラック

H&E法で使用されるヘマトキシリン溶液(製剤)の調製には多くの方法があり[11][12][6]、さらに、H&E染色スライドを作成するための多くのプロトコールがあり[9]、その中には特定のラボラトリーに特有のものもある[7]。標準的な手順はないが[11][9]、細胞核は青く染色され、細胞質と細胞外マトリックスはピンクに染色されるという点で、結果はほぼ一貫している[7]。Histology laboratoriesは、特定の病理学者のために染色の量や種類を調整することもある[7]

組織が採取され(多くの場合、生体組織診断として)固定された後、通常、脱水され、溶かしたパラフィンに包埋され、得られたブロックはミクロトームに取り付けられ、薄くスライスされる[6]。スライスは顕微鏡スライドに貼り付けられ、その時点でワックスが溶剤で除去され、スライドに貼り付けられた組織スライスは再水和され、染色準備が整う[6]。あるいは、H&E染色はモース手術で最も使用される染色法で、通常、組織を凍結し、クリオスタット(凍結した組織を切断するミクロトーム)で切断し、アルコールで固定してから染色する[9]

H&E染色では、金属塩または媒染剤と混合したヘマトキシリンを塗布し、多くの場合、弱酸性溶液ですすいで余分な染色(分化)を除去した後、弱アルカリ性水で青く染色する[13][8][14]。ヘマトキシリンを塗布した後、組織をエオジン(最も一般的なのはエオジンY)で対比染色する.[6][8][7]

結果

ヘマトキシリンは主に細胞核を青色または暗紫色に染め[6][15][14]ケラトヒアリン顆粒や石灰化物質などの他の組織も染まる。エオジンは、細胞質とコラーゲンなどの細胞外マトリックスを含むいくつかの構造を[5][7][14] 、最大5色のピンク色に染まる[8]。eosinophilic(エオジンで染色される物質)[5]構造は、一般に細胞内または細胞外のタンパク質で構成されている。レビー小体やマロリー小体はeosinophilic構造の例である。細胞質の大部分はeosinophilicで、ピンク色に染まる[10][15] 。赤血球は強い赤色に染色される[要出典]

作用機序

ヘマトキシリンの酸化型であるヘマテインが活性着色料であるが(媒染剤と組み合わせた場合)[5][16][14] 、染色は依然としてヘマトキシリンと呼ばれる[8][13] 。ヘマトキシリンは媒染剤(最も一般的なのはアルミニウムミョウバン)と組み合わせると、塩基性で正電荷を帯びた、または、カチオン性の染色に「似ている」[10]と見なされることが多い。エオジンは陰イオン性(負に帯電)で酸性の染色剤である[5][10]。ヘマリウム(アルミニウムイオンとヘマテインの組み合わせ)[14]による核の染色は、通常、色素-金属複合体とDNAとの結合によるものであるが、組織切片からDNA[14]を抽出した後に核染色を得ることもできる。この作用機序は、チオニンやトルイジンブルーなどの塩基性(カチオン性)色素による核染色とは異なる[10]。塩基性色素による染色は、ヘマリウムよりも酸性度の低い溶液からのみ起こり、核酸の化学的または酵素的抽出を事前に行うことで阻止される。アルミニウムとヘマテインを結合させているのと同様の配位結合が、ヘマリウム複合体をDNAや核クロマチン中のタンパク質のカルボキシ基に結合させていることを示す証拠がある[要出典]

basophilic、eosinophilicと呼ばれる構造には、酸性や塩基性である必要はない;この用語は、色素に対する細胞成分の親和性に基づいている。その他の色、例えば黄色や茶色もサンプルに含まれることがあるが、これはメラニンなどの固有色素によるものである。基底膜よく見える必要がある場合は、PAS染色や銀染色が必要である。細網線維も銀染色を必要とする。疎水性の構造もまた、透明なままである傾向がある。これらは通常、脂肪を多く含むもので、例えば脂肪細胞、神経細胞の軸索の周りのミエリン、ゴルジ体膜などである[要出典]

H&E染色組織の例

出典

  1. ^ a b Titford, M. (2005). “The long history of hematoxylin”. Biotechnic & Histochemistry 80 (2): 73–80. doi:10.1080/10520290500138372. PMID 16195172. 
  2. ^ a b Smith C (2006). “Our debt to the logwood tree: the history of hematoxylin.”. MLO Med Lab Obs 38 (5): 18, 20–2. PMID 16761865. 
  3. ^ a b “Dyes from a twenty-first century perspective.”. Biotech Histochem 84 (4): 135–7. (2009). doi:10.1080/10520290902908802. PMID 19384743. 
  4. ^ a b Rosai J (2007). “Why microscopy will remain a cornerstone of surgical pathology.”. Lab Invest 87 (5): 403–8. doi:10.1038/labinvest.3700551. PMID 17401434. 
  5. ^ a b c d e f g Chan JK (2014). “The wonderful colors of the hematoxylin-eosin stain in diagnostic surgical pathology.”. Int J Surg Pathol 22 (1): 12–32. doi:10.1177/1066896913517939. PMID 24406626. 
  6. ^ a b c d e f Stevens, Alan (1982). “The Haematoxylins”. In Bancroft, John; Stevens, Alan. The Theory and Practice of Histological Techniques (2nd ed.). Longman Group Limited. p. 109 
  7. ^ a b c d e f g h i j k l Wittekind D (2003). “Traditional staining for routine diagnostic pathology including the role of tannic acid. 1. Value and limitations of the hematoxylin-eosin stain.”. Biotech Histochem 78 (5): 261–70. doi:10.1080/10520290310001633725. PMID 14989644. 
  8. ^ a b c d e f Titford, Michael (2009). “Progress in the Development of Microscopical Techniques for Diagnostic Pathology”. Journal of Histotechnology 32 (1): 9–19. doi:10.1179/his.2009.32.1.9. ISSN 0147-8885. 
  9. ^ a b c d e Larson K, Ho HH, Anumolu PL, Chen TM (2011). “Hematoxylin and eosin tissue stain in Mohs micrographic surgery: a review.”. Dermatol Surg 37 (8): 1089–99. doi:10.1111/j.1524-4725.2011.02051.x. PMID 21635628. 
  10. ^ a b c d e f Ross, Michael H.; Pawlina, Wojciech (2016). Histology : a text and atlas : with correlated cell and molecular biology (7th ed.). Wolters Kluwer. pp. 984p. ISBN 978-1451187427 
  11. ^ a b c Schulte EK (1991). “Standardization of biological dyes and stains: pitfalls and possibilities.”. Histochemistry 95 (4): 319–28. doi:10.1007/BF00266958. PMID 1708749. 
  12. ^ Llewellyn BD (2009). “Nuclear staining with alum hematoxylin.”. Biotech Histochem 84 (4): 159–77. doi:10.1080/10520290903052899. PMID 19579146. 
  13. ^ a b “Hematoxylin: Mesoamerica's Gift to Histopathology. Palo de Campeche (Logwood Tree), Pirates' Most Desired Treasure, and Irreplaceable Tissue Stain.”. Int J Surg Pathol 27 (1): 4–14. (2019). doi:10.1177/1066896918787652. PMID 30001639. 
  14. ^ a b c d e f Kiernan JA (2018). “Does progressive nuclear staining with hemalum (alum hematoxylin) involve DNA, and what is the nature of the dye-chromatin complex?”. Biotech Histochem 93 (2): 133–148. doi:10.1080/10520295.2017.1399466. PMID 29320873. 
  15. ^ a b Leeson, Thomas S.; Leeson, C. Roland (1981). Histology (Fourth ed.). W. B. Saunders Company. pp. 600. ISBN 978-0721657042 
  16. ^ Kahr, Bart; Lovell, Scott; Subramony, Anand (1998). “The progress of logwood extract”. Chirality 10 (1–2): 66–77. doi:10.1002/chir.12. 

参考資料

  • Kiernan JA (2008) Histological and Histochemical Methods: Theory and Practice. 4th ed. Bloxham, UK: Scion.
  • Lillie RD, Pizzolato P, Donaldson PT (1976) Nuclear stains with soluble metachrome mordant lake dyes. The effect of chemical endgroup blocking reactions and the artificial introduction of acid groups into tissues. Histochemistry 49: 23–35.
  • Llewellyn BD (2009) Nuclear staining with alum-hematoxylin. Biotech. Histochem. 84: 159–177.
  • Puchtler H, Meloan SN, Waldrop FS (1986) Application of current chemical concepts to metal-haematein and -brazilein stains. Histochemistry 85: 353–364.

外部リンク

プロトコール


ヘマトキシリン・エオシン染色

出典: フリー百科事典『ウィキペディア(Wikipedia)』 (2021/11/16 15:31 UTC 版)

染色 (生物学)」の記事における「ヘマトキシリン・エオシン染色」の解説

ヘマトキシリン・エオシン染色(HE染色、H&E染色)は組織学組織薄片をみるのによく使われている。ヘマトキシリン青紫色色素であり、これに染まる組織ヘマトキシリン好性あるいは好塩基性という。具体的に細胞核骨組織軟骨組織一部漿液成分などである。エオシンは赤~ピンク色素であり、これに染まる組織をエオジン好性あるいは好酸性という。具体的に細胞質軟部組織結合組織赤血球線維素内分泌顆粒などである。特に赤血球エオシン強く吸収して明るい赤に染まる。青藍色に染まることもある。 エオシンはエオジンとも。

※この「ヘマトキシリン・エオシン染色」の解説は、「染色 (生物学)」の解説の一部です。
「ヘマトキシリン・エオシン染色」を含む「染色 (生物学)」の記事については、「染色 (生物学)」の概要を参照ください。

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