オーバーハング

分子生物学用語集

オーバーハング

上部が下部よりせり出した構造のこと。分子生物学では、dsDNAやdsRNAの突出している部分、あるいは突出している部分の配列をオーバーハングと呼ぶ。

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実験での利用

たとえば、ベクターとインサートをリガーゼでライゲーションする場合、相補的なオーバーハングを持つ２つの末端はライゲーションの特異性と効率が高い。インサートの向きを決めたい場合などには末端を異なる２種類の制限酵素で消化する。

オーバーハングの作製法

• 突出末端を生成する制限酵素で切断する。
• 制限酵素サイトをPCRのプライマーの5'末端側に付加しておき、制限酵素処理する。
• Taqで作成したPCR産物は、TaqのTdT活性によってAが付加されたオーバーハング。(TAクローニング)
• オーバーハングを生成するようなssDNAあるいはssRNAをアニーリングする。

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