フォーカス形成アッセイ（FFA）
出典: フリー百科事典『ウィキペディア（Wikipedia）』 (2021/09/14 19:30 UTC 版)
「ウイルス定量」の記事における「フォーカス形成アッセイ（FFA）」の解説
フォーカス形成アッセイ（FFA）はプラークアッセイの一部であるが、FFAはウイルス抗原に特異的な蛍光標識抗体を使用して、感染した宿主細胞とプラークが形成される前の感染ウイルス粒子を検出する免疫染色技術を用いる。 FFAは、プラーク形成と異なり細胞溶解を必要としないことから、細胞膜を溶解しないプラークアッセイに適さないウイルス種の定量に特に用いられる。プラークアッセイと同様に、単層の宿主細胞に段階希釈したウイルスサンプルを感染させ、感染性ウイルスの拡散を制限する半固体重層培地の下で比較的短い培養時間（24〜72時間など）インキュベートし、局所的な感染細胞のクラスター（フォーカス、病巣）を形成する。続いてプレートをウイルス抗原に対する蛍光標識抗体で染色し、蛍光顕微鏡を使用してフォーカスの数を数え、定量する。 FFA法では、通常、プラークや50％組織培養感染量（TCID50）アッセイよりも短時間で結果が得られるが、必要な試薬や機器の点で高価になることがある。測定時間は、測定者が数える領域のサイズにも依存する。より大きな領域はより多くの時間を必要とするが、より正確な値となる。 FFAの結果は、ミリリットルあたりのフォーカス形成単位（FFU / mL）として表される。
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